抗独特型抗体服务细胞培养常见问题--出现沉淀咋整?

2023-7-27 00:08| 发布者: 大海的鱼| 查看: 112| 评论: 0

摘要: 　抗独特型抗体服务细胞培养中会沉淀如何产生的呢?产生沉淀什么原因造成的,您知道吗?跟着小编一起来研究研究!　　细胞培养中的沉淀　　如果排除了污染,细胞培养基中的浑浊通常被解释为金属、蛋白和其他培养基组分的 ...

　抗独特型抗体服务细胞培养中会沉淀如何产生的呢?产生沉淀什么原因造成的,您知道吗?跟着小编一起来研究研究!
　　细胞培养中的沉淀
　　如果排除了污染,细胞培养基中的浑浊通常被解释为金属、蛋白和其他培养基组分的沉淀.沉淀物可能损害细胞健康,因为他们通过螯合可移除养分和其他需要的组分,从而改变培养基的组成.沉淀物也是显微镜可见的,可能会干扰依赖成像的实验分析.
　　产生沉淀的可能原因
　　一、温度变化
　　在细胞培养中,温度是引起沉淀的主要因素之一.当遭遇温度的变化时,高分子量血浆蛋白会从溶液中析出;热失活和冻融循环能促进蛋白降解和沉淀;因为液体或重组成培养基在使用之间保持冷藏储存,盐可能沉淀,尤其是10x或其他浓缩的储存液.
　　二、失水诱导的浓度改变
　　如果培养基可能蒸发,培养基组分(包括盐) 的浓度将会增加,特别是培养基表面可能容易形成晶体沉淀.
　　三、钙盐
　　制备无血清培养基时,组分添加的顺序可能导致不可溶分子的形成.钙盐尤其容易沉淀,比如CaCl2和MgSO4在溶液中反应产生CaSO4晶体.高压灭菌和pH值不稳定会加剧这一问题.
　　四、金属补充物
　　铜、铁和锌等金属离子是细胞生长所必需的,是无血清培养基的重要补充物.培养系统中其他血清组分的缺失可能导致这些金属沉淀,为细胞形成有毒的环境.在较高pH环境下(一般>8时),碳酸盐和氢氧根离子与铜离子、磷酸盐和氢氧根离子与铁离子、碳酸盐、磷酸盐和氢氧根离子与锌离子、氢氧根离子与镁离子易形成不溶性沉淀物;在氧化条件下,铜和锌更易于沉淀.